| 五节芒ISSR-PCR反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 金琳,葛刚,陈少风,杨赛钢,章泉.五节芒ISSR-PCR反应体系的优化[J].安徽农业科学,2009,37(29):14041-14043. |
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| 作者姓名： | 金琳 葛刚 陈少风 杨赛钢 章泉 |
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| 作者单位： | 南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌,330031;南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌,330031 |
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| 基金项目： | 国家"973"项目子项目 |
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| 摘 要： | ［目的］保护五节芒的种质资源并为其开发利用奠定基础。方法]以五节芒DNA为材料，分析DNA浓度、Mg^2＋浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶的含量以及退火温度对ISSR-PCR扩增结果的影响。并通过单因子试验对ISSR-PCR反应体系进行优化。［结果］建立了五节芒ISSR-PCR的最佳体系：25 μl反应体系中10×PCR Buffer 2.5 μl、0.2 mmol/L 4×dNTP、1.5 mmol/L Mg^2＋、0.75 U Taq DNA聚合酶。PCR反应程序为94 ℃预变性5 min；94 ℃变性30s；51-53 ℃退火30 s，72 ℃延伸50 s，40个循环；72 ℃再延伸7 min。利用优化反应体系从100个ISSR通用引物中筛选出了11个稳定性高、重复性好的引物。［结论］这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究五节芒遗传多样性奠定了基础。
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| 关 键 词： | 五节芒 基因组DNA ISSR-PCR 优化 |
Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Miscanthus floridulus |
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| JIN Lin et al.Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Miscanthus floridulus[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2009,37(29):14041-14043. |
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| Authors: | JIN Lin |
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| Institution: | JIN Lin et al(School of Life Sciences , Food Engineering,Nanchang University,Nanchang,Jiangxi 330031) |
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| Abstract: | Objective]The research aimed to protect the germplasm resources of Miscanthus floridulus and lay the foundation for its development and utilization.Method] With DNA of M.floridulus as materials,the effects of DNA concentration,Mg2+ concentration,dNTP concentration and Taq DNA polymerase content,and annealing temperature on the results of amplification ISSR-PCR results were analyzed.By using single factor test,ISSR-PCR reaction system was optimized.Result] The optimum system of ISSR-PCR for M.floridulus w... |
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| Keywords: | ISSR-PCR |
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