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猪蛔虫rAs37基因的克隆及原核表达
引用本文:周艳琴,冯汉利,聂浩,姚宝安,赵俊龙,孙明,喻子牛.猪蛔虫rAs37基因的克隆及原核表达[J].中国兽医学报,2009,29(2).
作者姓名:周艳琴  冯汉利  聂浩  姚宝安  赵俊龙  孙明  喻子牛
作者单位:1. 华中农业大学,动物医学院,湖北,武汉,430070;湖北省预防兽医重点实验室,湖北,武汉,430070
2. 华中农业大学,动物医学院,湖北,武汉,430070;湖北省预防兽医重点实验室,湖北,武汉,430070;湖北省出入境检验检疫局技术中心,湖北,武汉,430070
3. 华中农业大学,动物医学院,湖北,武汉,430070;湖北省预防兽医重点实验室,湖北,武汉,430070;农业微生物国家重点实验室,湖北,武汉,430070
4. 农业微生物国家重点实验室,湖北,武汉,430070
摘    要:根据编码rAs37的已知基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术从猪蛔虫感染性虫卵的cDNA中扩增编码rAs37的部分基因,克隆入pGEX-KG表达载体,转化入E.coli DH5α感受态细胞,经含氨苄青霉素琼脂平板筛选,小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定.然后阳性重组质粒转化入E.coli BL21-CodonPlus, IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定.结果显示,扩增的rAs37基因与GenBank中相应基因序列(AB078971)的同源性达100%,表达的rAs37融合蛋白表观相对分子质量约为60 000,且可被兔抗猪蛔虫免疫血清识别.说明所获得的表达蛋白质具有一定的反应原性,为下一步利用重组蛋白建立猪蛔虫早期诊断方法和研制猪蛔虫的亚单位疫苗奠定了基础.

关 键 词:猪蛔虫  基因克隆  表达

Cloning and protokaryonic expression of the Ascaris suum rAs37 gene
ZHOU Yan-qin,FENG Han-li,NIE Hao,YAO Bao-an,ZHAO Jun-long,SUN Ming,YU Zi-niu.Cloning and protokaryonic expression of the Ascaris suum rAs37 gene[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(2).
Authors:ZHOU Yan-qin  FENG Han-li  NIE Hao  YAO Bao-an  ZHAO Jun-long  SUN Ming  YU Zi-niu
Abstract:
Keywords:rAs37
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