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萝卜mRNA差异显示技术反应体系的优化及应用
引用本文:张慧蓉,龚义勤,柳李旺,杨金兰,黄丹琼,李培,宋闲勇.萝卜mRNA差异显示技术反应体系的优化及应用[J].江苏农业科学,2007(1):76-80.
作者姓名:张慧蓉  龚义勤  柳李旺  杨金兰  黄丹琼  李培  宋闲勇
作者单位:南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京,210095
基金项目:国家自然科学基金(编号:30300238),江苏省自然科学基金(编号:BK2004418),江苏省高技术研究计划(编号:BG2005314),南京农业大学SRT项目
摘    要:以萝卜品种短叶十三为材料,对影响mRNA差异显示(DDRT-PCR)反应体系的主要因子进行优化试验,最终确定了优化体系(15μl):随机引物0.5μmol/L,锚定引物1.0μmol/L,dNTPs 0.1~0.2 mmol/L,Mg2 1.5mmol/L,模板cDNA 15 ng,TaqDNA聚合酶0.9 U;并对PCR扩增程序中的复性温度进行梯度筛选,表明40℃较适合于萝卜mRNA差异显示(DDRT-PCR)反应体系。同时应用该优化体系分别对短叶十三花芽分化和扬花萝卜、春萝卜BYC抽薹过程中基因的差异表达进行初步分析。

关 键 词:萝卜  差异显示技术  体系优化  应用
文章编号:1002-1302(2007)01-0076-05
修稿时间:2006-06-07

Optimization and application of mRNA diferential display reaction system of radish
Zhang Huirong.Optimization and application of mRNA diferential display reaction system of radish[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2007(1):76-80.
Authors:Zhang Huirong
Abstract:
Keywords:
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