| 中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 王瑶,杨志刚,沈城,姚琴琴,曾奇韬,刘启彬,成永旭. 中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA克隆及表达分析[J]. 水产学报, 2014, 38(5): 651-661 |
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| 作者姓名： | 王瑶 杨志刚 沈城 姚琴琴 曾奇韬 刘启彬 成永旭 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306 |
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| 基金项目： | 国家“八六三”高技术研究发展计划（2012AA10A409-5）；国家农业科技成果转化项目（2012GB2C000147）；国家自然科学基金（40806068，41276158）；上海教委知识服务平台项目（ZF1206）；上海市科委非政府合作项目（11320706400；13340721500） |
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| 摘 要： | 为了研究蜕皮激素受体(EcR)在中华绒螯蟹蜕皮和性腺发育过程中的作用,本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)以及cDNA末端快速扩增(RACE)技术,克隆了中华绒螯蟹EcR基因全长cDNA序列。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,分析该基因在不同组织、蜕皮过程及卵巢发育阶段的表达特征,并研究了甲基法尼酯(MF)对卵巢中EcR的调控作用。结果显示,中华绒螯蟹EcR cDNA全长2 156 bp,编码422个氨基酸,其序列与招潮蟹相似性最高,为89%。荧光定量PCR结果显示,EcR在Y器官中表达量最高;在卵巢和肌肉中少量表达;在肝胰腺、鳃、心脏、胃、肠、胸神经节和脑神经节中微量表达。在中华绒螯蟹不同蜕皮时期中,Y器官中EcR表达量在D期和E期的表达量最高;肝胰腺中EcR表达量从AB期到D期有上升的趋势,到E期有所降低;肌肉中EcR表达量在AB期最高;鳃中EcR表达量在D期最高。在中华绒螯蟹卵巢发育过程中,EcR在卵巢发育Ⅰ~Ⅳ期的表达量有上升趋势,到Ⅴ期表达量降低;体外注射实验中,MF1(注射1μg)组的EcR表达量与对照组和生理盐水组无显著差异,而MF2(注射2μg)组的EcR表达量显著上升;离体培养实验中,MF1组(10-8mol/L)和MF2组(10-7mol/L)显著高于对照组和生理盐水组。研究表明,EcR基因在中华绒螯蟹蜕皮和卵巢发育过程有重要作用,MF可以调控EcR基因在卵巢中的表达。
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| 关 键 词： | 中华绒螯蟹 蜕皮激素受体（EcR） 基因克隆 蜕皮 卵巢发育 甲基法尼酯 |
| 收稿时间： | 2014-01-05 |
| 修稿时间： | 2014-03-07 |
The full length cDNA cloning and expression analysis of EcR from the Chinese mitten crab(Eriocheir sinensis) |
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| WANG Yao,YANG Zhigang,SHEN Cheng,YAO Qinqin,ZENG Qitao,LIU Qibin and CHENG Yongxu. The full length cDNA cloning and expression analysis of EcR from the Chinese mitten crab(Eriocheir sinensis)[J]. Journal of Fisheries of China, 2014, 38(5): 651-661 |
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| Authors: | WANG Yao YANG Zhigang SHEN Cheng YAO Qinqin ZENG Qitao LIU Qibin CHENG Yongxu |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Ministry of Agriculture, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Eriocheir sinensis EcR gene cloning molting ovarian development methyl farnesoate |
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