应用逆转录环介导等温扩增技术检测大豆种子中烟草环斑病毒 |
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引用本文: | 郭立新,陈先锋,徐亚飞,邱志君,朱迪琦,段维军.应用逆转录环介导等温扩增技术检测大豆种子中烟草环斑病毒[J].大豆科学,2012,31(6). |
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作者姓名: | 郭立新 陈先锋 徐亚飞 邱志君 朱迪琦 段维军 |
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作者单位: | 1. 北仑出入境检验检疫局,浙江宁波,315800 2. 宁波出入境检验检疫局,浙江宁波,315012 |
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基金项目: | 宁波检验检疫局科研项目,国家质检总局课题,质检公益性行业科研专项项目,浙江省重点科技创新团队项目 |
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摘 要: | 根据烟草环斑病毒(TRSV)外壳蛋白基因序列设计并合成了1组RT-LAMP引物,利用实时浊度仪监测反应过程,初步建立了烟草环斑病毒的RT-LAMP检测方法,并进行了特异性与灵敏度检测.结果显示,RT-LAMP灵敏度与普通RT-PCR法相当,但检测时间明显缩短,1h即可完成反应.此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可通过裸眼观察荧光的有无来判断是否有扩增.对大豆种子中携带的烟草环斑病毒进行了RT-LAMP检测,裸眼判定与仪器监测结果一致.结果证明所建立的TRSV RT-LAMP方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,不需复杂仪器设备,适合于TRSV的现场快速检测.
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关 键 词: | 烟草环斑病毒 逆转录环介导等温扩增 检测 |
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