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苎麻ISSR-PCR体系的优化
引用本文:刘立军,孙珍夏,彭定祥.苎麻ISSR-PCR体系的优化[J].中国农学通报,2006,22(7):64-68.
作者姓名:刘立军  孙珍夏  彭定祥
作者单位:华中农业大学植物科学技术学院,湖北,武汉,430070
基金项目:国家863项目“麻类作物高效育种技术及优质高产多抗新品种选育”(2001AA241121)。
摘    要:ISSR分子标记是在SSR标记基础上发展起来的一种新技术,ISSR标记成孟德尔式遗传,在多数物种中是显性的,目前已经广泛应用于植物品种鉴定、遗传作图、基因定位、遗传多样性、进化及分子生态学当中。笔者以苎麻自交系品种为材料,研究了苎麻ISSR分析过程中的影响因素,包括10×PCRBuffer、模板浓度、Mg2 、dNTP、引物、Taq酶、循环次数、退火温度等,建立了适于苎麻ISSR分析的PCR反应体系:即在20ul反应体系中,引物浓度为1.0umol/L;模板DNA的用量为60~100ng;Mg2 浓度为2.0mmol/L;dNTP浓度为0.2mmol/L;Taq酶用量为1U。适宜的扩增程序为先94℃变性5min,再94℃变性30sec、56℃复性45sec、72℃延伸90sec共34个循环,最后72℃延伸7min,4℃保存。

关 键 词:苎麻  ISSR  体系优化
收稿时间:2006-04-06
修稿时间:2006-04-062006-04-10

Optimization for ISSR Reaction System in Ramie (Boehmeria nivea L.Guad)
Liu Lijun,Sun Zhenxia,Peng Dingxiang.Optimization for ISSR Reaction System in Ramie (Boehmeria nivea L.Guad)[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2006,22(7):64-68.
Authors:Liu Lijun  Sun Zhenxia  Peng Dingxiang
Abstract:
Keywords:Ramie  ISSR  System optimisation
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