SETD2在猪卵母细胞体外成熟中的作用 |
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作者姓名: | 高乐鹏 余思聪 刘双 马馨 李所 |
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作者单位: | 吉林农业大学动物科学技术学院,长春130118 |
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基金项目: | 吉林省科技发展计划项目(20190103149JH);;国家自然科学基金项目(31902162); |
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摘 要: | SETD2是H3K36me3特异性甲基转移酶,参与组蛋白甲基化修饰,并通过调节多种基因的表达影响细胞功能。为探究SETD2在猪卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)过程中的表达规律及作用,通过免疫荧光染色检测SETD2及H3K36me3在猪卵母细胞IVM过程中各个时期(GV、MⅠ、MⅡ期)的表达定位情况;在GV期显微注射SETD2干扰RNA(SETD2-siRNA)构建干扰模型,检测干扰后对SETD2、H3K36me3、DNA双链断裂标志物(γH2AX)以及第一极体(PBI)排出率的影响;通过qPCR技术检测干扰后对DNA甲基化转移酶DNMT3B、凋亡和抗凋亡相关基因BAX、BCL2表达的影响。结果表明:SETD2信号GV期聚集在DNA周围,MⅠ和MⅡ期均在细胞质中表达,而H3K36me3在整个减数分裂过程中均与核共定位;进一步研究发现,SETD2-siRNA干扰后显著降低了SETD2和H3K36me3表达水平,增加了γH2AX表达(P<0.05),同时显著降低PBI排出率(P<0.05);qPCR结果显示,SETD2-siRNA干扰后DNMT3...
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关 键 词: | SETD2 猪卵母细胞 H3K36me DNA损伤 |
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