乙型脑炎病毒NS1△63蛋白发酵工艺优化研究 |
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作者姓名: | 陶飞飞 卞佳宁 余文捡 刘仕国 熊海月 钟鸣 孔令保 王婷 |
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作者单位: | 江西农业大学生物科学与工程学院/南昌市动物病毒与基因工程重点试验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31960699);;江西省自然科学基金重点项目(20224ACB205004); |
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摘 要: | 【目的】乙型脑炎病毒NS1蛋白能诱导机体产生保护性免疫,具有开发成亚单位疫苗的潜力。为提高重组蛋白NS1△63的原核表达量,研究进行发酵条件优化以开发稳定高产的蛋白生产工艺。【方法】采用单因素与PlackettBurman试验对培养基成分进行优化,同时探究诱导条件对发酵的影响,并在5 L发酵罐中进行初步的工艺放大验证。【结果】最佳的培养基成分为乳糖10 g/L、酵母粉19 g/L、蛋白胨25 g/L、磷酸盐37.5 mmol/L、氯化钾1.25 g/L。最佳发酵条件是诱导温度36℃、诱导时间12 h、0.6 mmol/L IPTG、5%接种量。蛋白产量提高到优化前的3.25倍,5 L发酵罐蛋白产量可达3 022.23 mg/L。【结论】研究显著提高了NS1△63蛋白的原核产量,为该蛋白应用于亚单位疫苗和检测试剂盒的相关研究奠定了基础。
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关 键 词: | 乙型脑炎病毒 NS1△63 大肠杆菌 发酵优化 Plackett-Burman试验 |
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