多主棒孢SdhB-H278Y突变位点real-time PCR检测体系的建立与应用 |
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引用本文: | 朱广雪,阎昱韬,孙炳学,周荣佳,岳圆圆,谢学文,柴阿丽,李磊,李宝聚,石延霞.多主棒孢SdhB-H278Y突变位点real-time PCR检测体系的建立与应用[J].中国蔬菜,2023(1):60-67. |
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作者姓名: | 朱广雪 阎昱韬 孙炳学 周荣佳 岳圆圆 谢学文 柴阿丽 李磊 李宝聚 石延霞 |
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作者单位: | 1. 青岛农业大学园艺学院;2. 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
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基金项目: | 国家大宗蔬菜产业技术体系项目(CARS-23);;国家自然科学基金项目(31972482);;中国农业科学院创新工程项目(CAASASTIP-IVFCAAS); |
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摘 要: | 根据Gen Bank已登录序列中黄瓜多主棒孢琥珀酸脱氢酶B亚基(Sdh B)基因序列差异,针对Sdh B-H278Y突变设计特异性引物,建立Sdh B-H278Y突变实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测体系。结果表明:供试多主棒孢携带Sdh B-H278Y、Sdh B-I280V突变;Sdh B-H278Y突变株对啶酰菌胺抗性较强,EC50值为21.47μg·m L-1或>30μg·m L-1;建立的real-time PCR检测体系具有良好的线性关系,相关系数R2=0.992 9,可特异性检测Sdh B-H278Y突变,灵敏度为3.6×10-4ng·μL-1,为AS-PCR的10倍。利用携带Sdh B-H278Y突变不同比例的基因组DNA对检测体系进行验证,预期值与检测值具有很高的相关性,R2=0.999 7;利用该检测体系对山东地区黄瓜棒孢叶斑病病斑中多主棒孢Sdh B-H278Y突变株所占比例进行检测,检测...
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关 键 词: | 黄瓜 多主棒孢 real-time PCR 抗药性 啶酰菌胺 |
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