家蚕微孢子虫假定层粘连蛋白基因NbHLAMB4的克隆和序列分析及互作蛋白质筛选 |
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引用本文: | 李楠,戴卫江,李孝良,彭祥然,唐旭东,徐莉,沈中元.家蚕微孢子虫假定层粘连蛋白基因NbHLAMB4的克隆和序列分析及互作蛋白质筛选[J].蚕业科学,2016,42(4). |
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作者姓名: | 李楠 戴卫江 李孝良 彭祥然 唐旭东 徐莉 沈中元 |
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作者单位: | 江苏科技大学,江苏镇江,212003;江苏科技大学,江苏镇江212003;中国农业科学院蚕业研究所,江苏镇江212018 |
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基金项目: | 现代农业产业技术体系建设专项 |
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摘 要: | 层粘连蛋白是重要的细胞外基质成分之一,在基膜的构建及细胞的黏附等方面都有重要作用。通过检索微孢子虫数据库发现家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)存在假定层粘连蛋白基因Nb HLAMB4,根据该基因序列设计引物,以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板克隆了Nb HLAMB4基因。该基因的开放阅读框(ORF)全长为1 104 bp,预测编码的蛋白质含有367个氨基酸,分子质量为43.74 k D,等电点为5.72。Nb HLAMB4蛋白序列含有一个N-糖基化位点和Pfam:SAS-6_N结构域,无信号肽,也无跨膜结构域。应用酵母双杂交技术,以Nb HLAMB4作为诱饵蛋白,通过筛选家蚕中肠c DNA文库,初步得到3个与Nb HLAMB4互作的候选蛋白质,分别是家蚕热休克蛋白(Hsp40)、锌指蛋白420类似物(similar to zinc finger protein 420)、氨肽酶N(aminopeptidase N)。研究结果为阐明家蚕微孢子虫的侵染机制提供了新的线索。
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关 键 词: | 家蚕微孢子虫 假定层粘连蛋白 基因克隆 酵母双杂交技术 互作蛋白质 |
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