澳洲坚果SSR-PCR反应体系优化及其应用 |
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引用本文: | 唐莹莹,杨祥燕,蔡元保,李穆,曾黎明,郑文武,邱文武,李季东,叶维雁.澳洲坚果SSR-PCR反应体系优化及其应用[J].福建农业学报,2018(2). |
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作者姓名: | 唐莹莹 杨祥燕 蔡元保 李穆 曾黎明 郑文武 邱文武 李季东 叶维雁 |
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作者单位: | 广西壮族自治区亚热带作物研究所;广西壮族自治区农业科学院园艺研究所 |
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摘 要: | 以澳洲坚果DNA为模板,通过单因素设计方法对影响SSR-PCR反应体系的5个主要因素进行了优化。结果表明,澳洲坚果SSR-PCR反应体系的最适条件为:20μL的反应体系中,包含30mg·L~(-1)模板DNA,1.0UTaq聚合酶,2.5mmol·L~(-1) Mg~(2+),0.6μmol·L~(-1)引物和0.3mmol·L~(-1)dNTPs。采用该反应体系对不同引物和15份澳洲坚果种质进行验证,扩增条带的可靠性和稳定性良好,且分辨率较高。因此,该SSR-PCR反应体系可用于澳洲坚果种质源鉴定及遗传多样性分析研究。
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