澳洲坚果RAPD标记反应体系的建立及应用

以澳洲坚果为试材,利用单因素试验对影响RAPD标记反应体系的主要因素进行优化,建立适合澳洲坚果RAPD标记的反应体系。结果表明,澳洲坚果RAPD最优反应体系为:20μL反应体系中,模板DNA 40 mg/L,引物0.6μmol/L,Taq聚合酶1.0 U,Mg2+2.5 mmol/L和dNTPs 0.4mmol/L。利用该最优反应体系对不同引物和澳洲坚果种质进行验证,扩增条带具有良好的可靠性和稳定性,且分辨率较高,可用于澳洲坚果种质资源鉴定及遗传多样性分析等。