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猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒HN-HW株ORF2-7基因的克隆与序列分析
引用本文:郝雪峰,关贵全,李有全,马米玲,刘爱红,马新龙,江丽丽,殷宏,罗建勋.猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒HN-HW株ORF2-7基因的克隆与序列分析[J].华北农学报,2009,24(4).
作者姓名:郝雪峰  关贵全  李有全  马米玲  刘爱红  马新龙  江丽丽  殷宏  罗建勋
作者单位:1. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730046
2. 内蒙古呼和浩特市新城区畜牧兽医局,内蒙古,呼和浩特,010050
基金项目:中国农业科学院兰州兽医研究所所长基金 
摘    要:为了研制有效的PRRS疫苗,参照GenBank中公布的猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型ATCC VR-2332基因序列,用Primer 5.0软件分别设计合成了针对PRRSV ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从HN-HW株分别扩增得到了大小约771,904,564,670,619和586 bp的片段,并将扩增的片段插入pGEM-Teasy载体,然后转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中,挑取阳性克隆PCR和酶切鉴定后进行测序.利用DNAStar软件将HN-HW株ORF2-7基因的核苷酸序列和推导氨基酸序列与ATCC VR-2332、JX-A1、CH-1a、BJ-4、HB-1、HB-2、HEB-1、HUB-1、HUB-2、SP、P129、MN184A、RespPRRS MLV、Prime Pac、LV等毒株相应序列进行了同源性分析,并绘制系统进化树.结果显示,HN-HW株与美洲型ATCC VR-2332核苷酸同源性为88.9%~94.9%,与欧洲型LV核苷酸同源性为64.0%~69.0%;推导氨基酸序列与ATCC VR-2332株同源性为82.4%~96.0%,与LV株的同源性为34.5%~78.9%.系统进化树表明,HN-HW株属于美洲型,与JXA1、HUB-1、HUB-2、HEB-1亲缘关系较近.

关 键 词:猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒  HN-HW株  克隆与序列分析

Cloning and Sequence Analysis of ORF2-7 Genes of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus HN-HW Strain
HAO Xue-feng,GUAN Gui-quan,LI You-quan,MA Mi-ling,LIU Ai-hong,MA Xin-long,JIANG Li-li,YIN Hong,LUO Jian-xun.Cloning and Sequence Analysis of ORF2-7 Genes of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus HN-HW Strain[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2009,24(4).
Authors:HAO Xue-feng  GUAN Gui-quan  LI You-quan  MA Mi-ling  LIU Ai-hong  MA Xin-long  JIANG Li-li  YIN Hong  LUO Jian-xun
Abstract:
Keywords:ORF2-7
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