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重组鸡β-防御素12蛋白的原核表达及其生物学特性分析
引用本文:马得莹,徐杨,李妍妍,徐倩倩,张婷婷,韩宗玺,刘胜旺.重组鸡β-防御素12蛋白的原核表达及其生物学特性分析[J].东北农业大学学报,2014(10).
作者姓名:马得莹  徐杨  李妍妍  徐倩倩  张婷婷  韩宗玺  刘胜旺
作者单位:1. 东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨,150030
2. 东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨 150030; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽病研究室,哈尔滨 150001
3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽病研究室,哈尔滨,150001
基金项目:黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(PC13S02);教育部高等学校博士学科点专项基金(20122325110016);哈尔滨市科技创新人才研究专项资金
摘    要:为探讨鸡β-防御素12(AvBD12)的生物学特性,试验采用RT-PCR方法从鸡脾脏组织中扩增到鸡AvBD12基因,其cDNA大小为198 bp,编码65个氨基酸。将该基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pProex HTa上,进行原核表达。Tricine-SDS-PAGE电泳表明,重组鸡AvBD12融合蛋白分子质量约为14 ku。对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定,结果显示,纯化后的重组鸡AvBD12融合蛋白对金黄色葡萄球菌和兔波氏杆菌有较高抗菌活性,对猪霍乱沙门氏菌和乳酸菌的抗菌活性较弱。高盐浓度对其抗菌活性有显著影响。该重组蛋白对鸡红细胞无显著溶血活性。荧光定量PCR结果表明,AvBD12基因在所测定的15个鸡组织器官中均有表达。

关 键 词:鸡β-防御素12  重组蛋白  抗菌活性  组织分布
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