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鸡传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究
引用本文:李广兴,杜威威,韩溪,潘龙,王新,白妍,洪琴,马玲,任晓峰,杨贵君. 鸡传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究[J]. 东北农业大学学报, 2014, 0(10)
作者姓名:李广兴  杜威威  韩溪  潘龙  王新  白妍  洪琴  马玲  任晓峰  杨贵君
作者单位:1. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030
2. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨 150030; 上海药明康德新药开发有限公司,上海 200131
摘    要:文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒(IBV)HH06株M全长基因,经抗原性和亲水性分析,将M部分序列成功亚克隆于pET-30a(+)和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化E. coli Rosetta (DE3)感受态细胞,诱导表达获得20 ku重组M蛋白。Western blot检测表明,重组蛋白能够与IBV参考阳性血清反应。以纯化重组M蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,其ELISA效价达到1??218;Western blot结果证实,其具有良好的反应性和特异性。间接免疫荧光试验表明,抗M蛋白多克隆抗体可检测到PVAX-M1转染BHK-21细胞表达的M蛋白,与IBV HH06毒株具有很好的特异性反应。病毒感染抑制试验表明,多抗血清对IBV Beaudette株的抑制率可达到25.9%。为IBV检测及M蛋白功能的研究奠定基础。

关 键 词:传染性支气管病毒  膜蛋白  多克隆抗体  间接免疫荧光试验  免疫印迹试验

Preparation of polyclonal antibody against recombinant M protein of IBV HH06 strain and biological function
LI Guangxing,DU Weiwei,HAN Xi,PAN Long,WANG Xin,BAI Yan,HONG Qin,MA Ling,REN Xiaofeng,YANG Guijun. Preparation of polyclonal antibody against recombinant M protein of IBV HH06 strain and biological function[J]. Journal of Northeast Agricultural University, 2014, 0(10)
Authors:LI Guangxing  DU Weiwei  HAN Xi  PAN Long  WANG Xin  BAI Yan  HONG Qin  MA Ling  REN Xiaofeng  YANG Guijun
Abstract:
Keywords:IBV  membrane protein  polyclonal antibody  indirect fluorescence antibody assay  Western blot
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