| H5亚型禽流感病毒HA基因杆状病毒系统的表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 查国飞,唐应华,陆吉虎,陈辉,刘振兴,田震,侯继波,李培英.H5亚型禽流感病毒HA基因杆状病毒系统的表达及活性鉴定[J].畜牧与兽医,2014(3):15-19. |
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| 作者姓名： | 查国飞 唐应华 陆吉虎 陈辉 刘振兴 田震 侯继波 李培英 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学动物科技学院;江苏省农业科学院 / 国家兽用生物技术工程技术研究中心 |
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| 基金项目： | 江苏省农业自主创新项目(CX(11)4072);国家自然基金项目(31201904);农业部公益性行业(农业)科研专项经费项目(201303046);科技部国家高技术研究发展计划“863”课题(2011AA10A213) |
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| 摘 要： | 通过PCR方法从人工合成的质粒(232HAc-T)扩增获得全长的HA基因和缺失信号肽及跨膜区的HA基因。将此HA基因克隆至杆状病毒表达系统,构建重组穿梭载体rBac-232HAc和rBac-232HAδST,转染Sf9细胞后获得重组的杆状病毒rAc-232HAc和rAc-232HAδST。重组病毒在Sf9细胞中表达2种重组蛋白232HAc和232HAδST。2种蛋白在SDS-PAGE和Western blot检测中均获得预期目的条带,间接免疫荧光(IFA)检测呈阳性。血凝试验结果显示,232HAc蛋白能够使红细胞凝集,血凝(HA)效价为8log2;而232HAδST的HA效价低于2log2。血凝抑制试验结果表明,232HAc蛋白与H5阳性血清反应良好,效价类似于H5检测抗原对照,但不与其他病毒血清反应。结果提示:2种重组蛋白均能在Sf9细胞中表达,但重组232HAc蛋白能具有较好的血凝性,并能被H5阳性血清特异性抑制。本研究为研发H5亚型禽流感HA蛋白亚单位疫苗提供了生物材料。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 HA蛋白 杆状病毒 活性 |
Expression and activity identification of HA protein of avian influenza subtype H5 in recombinant baculovirus |
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| ZHA Guofei;TANG Yinghua;LU Jihu;CHEN Hui;LIU Zhenxing;TIAN Zhen;HOU Jibo;LI Peiying.Expression and activity identification of HA protein of avian influenza subtype H5 in recombinant baculovirus[J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2014(3):15-19. |
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| Authors: | ZHA Guofei;TANG Yinghua;LU Jihu;CHEN Hui;LIU Zhenxing;TIAN Zhen;HOU Jibo;LI Peiying |
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| Institution: | ZHA Guofei;TANG Yinghua;LU Jihu;CHEN Hui;LIU Zhenxing;TIAN Zhen;HOU Jibo;LI Peiying;College of Animal Science and Technology,Anhui Agricultural University;National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences; |
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