| 绿色荧光蛋白转基因小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养 |
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| 引用本文： | 吴曙限,孙健,刘西梅,刘中华,孙世铎,乔宪凤,肖红卫,郑新民.绿色荧光蛋白转基因小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养[J].畜牧与兽医,2009,41(12). |
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| 作者姓名： | 吴曙限 孙健 刘西梅 刘中华 孙世铎 乔宪凤 肖红卫 郑新民 |
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| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨凌,712100
2. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/湖北省动物胚胎工程及分子育种重点实验室,湖北,武汉,430064
3. 西北农林科技大学动物医学院,陕西,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家自然基金，国家新品种培育专项 |
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| 摘 要： | 研究了不同胎龄、消化液、培养液对转绿色荧光蛋白(GFP)基因小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离和培养的影响,并对其生长形态进行观察。结果表明,在实验室条件下,12.5～14.5d胎龄的GFP-MEF分离效果最好,0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA所用时间短,消化后培养细胞贴壁率高;GFP-MEF形态以小梭形为主,呈漩涡状、鱼群状生长;最佳培养液为DMEM添加10%胎牛血清。研究获得了实验室分离制备GFP-MEF的方法,为制作饲养层和进一步构建转基因动物奠定基础。
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白基因 小鼠胚胎成纤维细胞 分离 培养 |
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