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大片吸虫成虫cDNA文库的构建和组织蛋白酶L1基因的克隆
引用本文:郭敏,徐梅倩,岳城,何国声. 大片吸虫成虫cDNA文库的构建和组织蛋白酶L1基因的克隆[J]. 中国兽医寄生虫病, 2007, 15(3): 25-28
作者姓名:郭敏  徐梅倩  岳城  何国声
作者单位:1. 新疆农业大学,乌鲁木齐,830052;中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232
2. 中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232
3. 新疆农业大学,乌鲁木齐,830052
基金项目:畜禽主要寄生虫虫种资源的收集与保存(2002DEB10050)
摘    要:目的大片吸虫cDNA文库的构建及组织蛋白酶L1(Fasciola gigantica Cathepsin L1,FgCL1)基因的克隆。方法提取大片吸虫成虫总RNA,运用SMART技术构建大片吸虫cDNA文库。根据文献设计并合成PCR引物,从上述文库中克隆大片吸虫FgCL1基因,定向克隆至原核表达载体pET28a中。结果文库容量为2.08×106pfu/mL,重组率为98%。扩增后的文库滴度为6.23×109 pfu/mL,插入片段平均大小约为1 000 bp。应用两个已知基因(FgCL1 FgGST)从文库中成功钓取到相应的全长基因。将含有FgCL1的阳性克隆测序,用Genebank Blast进行序列比较,证实为FgCL1基因。结论成功构建了cDNA文库,提供筛选大片吸虫基因资源;从该文库中克隆出FgCL1,为进一步表达该基因,研制诊断试剂盒创造了条件。

关 键 词:大片吸虫  cDNA文库  组织蛋白酶L1
文章编号:1005-0868(2007)03-0025-04
收稿时间:2005-03-07
修稿时间:2005-03-07

CONSTRUCTION OF FASCIOLA GIGANTICA CDNA LIBRARY AND CLONING OF CATHEPSIN L1 GENE
GUO Min,XU Mei-qian,YUE Cheng,HE Guo-sheng. CONSTRUCTION OF FASCIOLA GIGANTICA CDNA LIBRARY AND CLONING OF CATHEPSIN L1 GENE[J]. Chinese Journal of Veterinary Parasitology, 2007, 15(3): 25-28
Authors:GUO Min  XU Mei-qian  YUE Cheng  HE Guo-sheng
Abstract:
Keywords:Fasciola gigantica  cDNA library  cathepsin L1
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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