| 猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立 |
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| 作者姓名： | 史平玲 邬成业 乔松林 张改平 王爱萍 肖治军 祁艳华 卜丹 |
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| 作者单位： | 1. 河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,郑州,450002
2. 郑州大学生物工程系,郑州,450001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目，国家973计划 |
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| 摘 要： | 本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)和G418(400μg.mL-1)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系,且表达于转染细胞表面的poFcγRⅠ受体分子能与猪IgG特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪FcγRⅠ受体 共转染 Marc-145细胞 |
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