盐胁迫条件下杜梨叶片差异表达基因qRT-PCR内参基因筛选

为了准确评价盐胁迫下杜梨（Pyrus betulaefolia Bunge.）目标基因表达量，筛选q RT-PCR适用内参基因。利用杜梨的全基因组注释信息和转录组测序数据，选择Actin2(Chr15.g01351)、EF1α-1(Chr3.g19898)、EF1α-2(Chr4.g38173)、EF2(Chr5.g06899)、GAPDH-1(Chr16.g30426)、GAPDH-2(Chr13.g23532)、TUBB(Chr5.g06472)、UBQ(Chr4.g40121)等8个候选基因，设计Actin2、EF1α-1、EF1α-2A、EF1α-2B、EF2、GAPDH-1、GAPDH-2、TUBB-A、TUBB-B、UBQE等10对qRT-PCR引物。首先对10对引物的扩增效率进行了测定，再以200 mmol·L-1的NaCl溶液对两个杜梨家系（盐城和连云港）幼苗进行0、24、48、72 h盐胁迫处理。提取叶片的总RNA，反转录合成cDNA，使用10对引物进行q RT-PCR扩增，根据扩增产物使用delta Ct、BestKeeper、geNorm和NormFinder等4...