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| HEBP1基因敲除对牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞中增殖的影响 | |
| 作者单位： | 新疆农业大学动物医学学院 ,新疆乌鲁木齐830052 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;新疆维吾尔自治区自然科学基金;新疆维吾尔自治区自然科学基金;人才培养项目;新疆农业大学畜牧学博士后流动基金项目;新疆农业大学畜牧学博士后流动基金项目 |
| 摘 要： | 为研究血红素结合蛋白1(HEBP1)对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)复制的影响,应用CRISPR/Cas9技术建立HEBP1基因敲除的MDBK细胞系;用BVDV TC株感染HEBP1基因敲除的MDBK细胞,用免疫荧光染色检测BVDV双链RNA(dsRNA)水平,观察BVDV致细胞病变效应(CPE)情况,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测BVDV 5′UTR mRNA水平,Reed-Muench测定病毒滴度变化。结果表明,成功构建HEBP1基因敲除的MDBK稳定细胞系,敲除效率为72.41%;敲除HEBP1基因显著性抑制BVDV 5′UTR mRNA和dsRNA积累,减弱BVDV感染靶细胞的CPE,降低BVDV滴度。说明敲除HEBP1基因显著性抑制BVDV的复制,为抗BVDV研究提供新的思路和药物靶点。 |
| 关 键 词： | 血红素结合蛋白1 牛病毒性腹泻病毒 CRISPR/Cas9基因编辑 病毒复制 |
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