| 耐药基因mcr-1和blaNDM-1的双重荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 作者单位： | 甘肃农业大学动物科学技术学院 ,甘肃兰州730070;福建省农业科学院畜牧兽医研究所 ,福建福州350000;甘肃农业大学动物科学技术学院 ,甘肃兰州730070;福建省农业科学院畜牧兽医研究所 ,福建福州350000;福建光华实业集团 ,福建福州350117 |
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| 摘 要： | 为快速同时检测多黏菌素抗性基因mcr-1和编码新德里金属-β-内酰胺酶1(NDM-1)的bla_(NDM-1)基因,基于mcr-1和bla_(NDM-1)的保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,创建双重荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法特异性检测仅能扩增阳性质粒,对照菌株均无特异性曲线;组内重复变异系数和组间重复变异系数均小于1.5%;质粒标准品的检出下限为2.28×2~3拷贝/μL。用该方法对92株分离细菌和24份猪场环境样品进行检测,mcr-1和bla_(NDM-1)基因均显示阴性;24份猪口腔液样品,其中5份样品检测到mcr-1基因,1份猪口腔液中同时携带mcr-1基因和bla_(NDM-1)基因。
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| 关 键 词： | 多黏菌素 mcr-1基因 blaNDM-1基因 双重荧光定量PCR |
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