罗非鱼无乳链球菌疫苗研制及检测IgM抗体ELISA方法的建立

为研究新型罗非鱼链球菌疫苗,并且建立检测罗非鱼无乳链球菌IgM抗体水平的ELISA方法,试验首先纯化了罗非鱼血清中的IgM,制备抗IgM的兔高免血清,优化反应条件,比较不同浓度浸泡型疫苗和注射型疫苗的相对免疫保护率,并利用建立的ELISA方法监测罗非鱼免疫后2周抗体水平以及攻毒后4个月内的免疫鱼血清抗体水平变化。结果表明:高浓度浸泡型疫苗能达到88. 65%的相对保护率; ELISA方法特异性较高,重复试验中变异系数最大值为8. 33%,灵敏度为1∶400。通过对免疫鱼血清抗体的跟踪监测,表明血清抗体在免疫后2周明显上升,且产生的免疫保护力可长达4个月之久。说明建立的ELISA方法可以检测罗非鱼IgM抗体,制备的疫苗通过浸泡的方式免疫,可使罗非鱼获得长达4个月的保护力。