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牛FOXM1基因特异性siRNA干扰效率的分析
作者姓名:王超  张淑琴  宋雪莹  王改丽  孙娜  郭利  程世鹏
作者单位:中国农业科学院特产研究所/农业部经济动物疫病重点实验室/特种动物分子生物学重点实验室;黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院;吉林省畜牧兽医科学研究院
摘    要:为了筛选到有效干扰牛叉头框M1(forkhead box M1,FOXM1)基因特异性siRNA,试验设计并合成3个靶向干扰牛FOXM1的5-羧基荧光素(FAM)标记siRNA,对siRNA转染剂量进行优化,筛选出干扰效果较好的siRNA,并检测干扰FOXM1后MDBK细胞中LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的表达水平。结果表明:siRNA的最佳转染剂量为1.5μL(20μmol/L),3个特异性siRNA的干扰效率分别为34.2%、52.0%及72.5%,干扰牛FOXM1基因效果最好的siRNA是siRNA-929,它能够阻止细胞中LC3-Ⅰ型向LC3-Ⅱ型的转化,使自噬过程受到抑制。说明试验成功筛选到干扰牛FOXM1基因的特异性siRNA。

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