首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
     检索      

茶树GDP-甘露糖-3′,5′-异构酶基因cDNA全长的克隆与表达
引用本文:李 佼,余有本,周天山.茶树GDP-甘露糖-3′,5′-异构酶基因cDNA全长的克隆与表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(12):100-106.
作者姓名:李 佼  余有本  周天山
作者单位:西北农林科技大学 茶叶研究所;西北农林科技大学 茶叶研究所;西北农林科技大学 茶叶研究所
基金项目:中央高校基本科研业务费专项(QN 2013017);唐仲英育种基金项目(10YZ034);西北农林科技大学农业科技推广专项(TGZX2012-08)
摘    要:【目的】对茶树GDP-甘露糖-3′,5′-异构酶(GDP-Mannose-3′,5′-epimerase,GME)基因cDNA全长进行克隆分析及原核表达。【方法】以茶树品种"乌牛早"叶片的cDNA为模板,用RT-PCR和RACE技术克隆GME,并对其进行生物信息学分析。利用pETiteTM N-His SUMO Vector构建GME原核表达载体pET-GME,在大肠杆菌HI-Control BL21(DE3)中进行原核诱导表达。采摘同一茶树嫩茎、芽、叶片以及不同品种茶树叶片样品,提取其RNA,反转录合成cDNA后,通过荧光定量PCR分析GME在不同茶树组织和品种中的表达谱。【结果】克隆获得了长度为1 427bp的GMEcDNA全长序列,其包含长度为1 131bp的开放阅读框,编码376个氨基酸。构建了GME原核表达载体pETGME,其在大肠杆菌HI-Control BL21(DE3)中能诱导表达分子质量约60ku的融合蛋白。荧光定量PCR结果显示,GME基因在芽中的表达量最高,在嫩茎中的表达量最低,在叶片中的表达量随成熟度的增加而逐渐降低;在不同茶树品种之间的表达也存在明显差异。【结论】从茶树叶片中克隆得到了GMEcDNA全长序列,并成功对其进行了原核表达。

关 键 词:茶树  GDP-甘露糖-3′  5′-异构酶  荧光定量PCR  原核表达  SUMO表达系统
收稿时间:2013/1/14 0:00:00
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》浏览原始摘要信息
点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》下载免费的PDF全文
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号