牛白血病前病毒Taqman荧光PCR检测方法的建立

设计并合成荧光引物,建立了Taqman荧光PCR体系,可快速检测全血样品中的牛白血病前病毒DNA。所建立的荧光PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸,而对牛病毒性腹泻—粘膜病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)以及羊胎肾细胞(FLK)、牛布鲁氏菌扩增均呈阴性反应,对pBST-pol重组质粒的检测敏感性可达0.32拷贝。重复性实验的Ct值变异系数介于0.67%~1.16%之间,稳定性实验的Ct值变异系数为3.14%。采用建立的Taqman荧光PCR体系和OIE推荐的套式PCR对94份临床样品进行检测,两者定性符合率达到97.87%。