双峰驼TLR3蛋白的表达与抗体制备及在肾脏的分布 |
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引用本文: | 张睿,李沛轩,刘转霞,刘静宇,房映栋,刘柯江,张旺东,王雯慧.双峰驼TLR3蛋白的表达与抗体制备及在肾脏的分布[J].动物医学进展,2023(6):59-64. |
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作者姓名: | 张睿 李沛轩 刘转霞 刘静宇 房映栋 刘柯江 张旺东 王雯慧 |
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作者单位: | 甘肃农业大学动物医学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31960693,31760723); |
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摘 要: | 为制备双峰驼Toll样受体3(TLR3)的抗体,分析其在肾脏中的表达特征。用生物信息学分析及原核表达方式,分析、表达和纯化了双峰驼TLR3重组蛋白,并制备多克隆抗体,用间接酶联免疫吸附试验和免疫印迹法测定抗体效价及其特异性,利用制备的多克隆抗体采用免疫组织化学染色观察TLR3在双峰驼肾脏组织中的表达。结果显示,得到的目的蛋白大小与预测结果相符,为74 ku, IPTG最佳诱导浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导时间为6 h,重组蛋白主要以包涵体形式表达,抗体效价达1∶64 000;免疫印迹结果显示,原核表达的TLR3蛋白和双峰驼肾脏组织中表达的TLR3蛋白均能被该抗体特异性识别,TLR3在双峰驼肾小管上皮细胞和肾小球系膜细胞均有表达。研究结果为进一步探究双峰驼TLR3在肾脏中发挥作用的机制积累了资料。
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关 键 词: | 双峰驼 Toll样受体3 原核表达 抗体制备 肾脏 |
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