一种犬耳痒螨PCR检测方法的建立及应用

为了能从犬、猫耳垢中对犬耳痒螨(Otodectes cynotis)进行特异性检测，基于犬耳痒螨18S-ITS1基因序列设计特异性引物，通过对退火温度等条件进行优化，建立犬耳痒螨特异性PCR检测方法。结果显示，该方法能成功从犬耳痒螨DNA样本中扩增出352 bp的特异性条带，特异性良好；其最低检测DNA浓度为0.897 fg/μL,敏感性较高。用所建立的PCR检测方法对78只犬、猫的耳垢样本进行检测，犬耳痒螨的阳性率为66.7%,高于显微镜检测结果(阳性率为62.8%);对52份经PCR方法检测的犬耳痒螨阳性样本进行种群结构分析，未发现犬耳痒螨rDNA ITS1序列的遗传变异出现地理差异和宿主特异情况。结果表明，建立的PCR方法能够应用于临床检测犬、猫耳垢样本中的犬耳痒螨，为犬、猫耳螨病的诊断提供了一种辅助方法。