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湖羊myogenin重组基因表达及其亚细胞定位的研究
引用本文:许峰 秦玉蓉 阴彦辉 张振韬 张亚妮 高波 杜立新 李碧春. 湖羊myogenin重组基因表达及其亚细胞定位的研究[J]. 中国农学通报, 2011, 27(7): 309-313
作者姓名:许峰 秦玉蓉 阴彦辉 张振韬 张亚妮 高波 杜立新 李碧春
作者单位:1. 扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州,225009
2. 中国农业科学院畜牧研究所国家畜禽分子遗传育种中心,北京,100193
摘    要:摘 要: [目的]构建湖羊肌细胞生成素(myogenin,MyoG)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白真核表达载体,分析EGFP-MyoG融合蛋白在NIH-3T3细胞的表达及亚细胞定位。[方法]利用PCR技术扩增出MyoG基因完整的CDS,克隆至真核表达载体pEGFP-C1,转染NIH-3T3细胞,荧光显微镜下观察EGFP-MyoG融合蛋白的亚细胞定位,并通过RT-PCR、western blot检测蛋白的表达。[结果]酶切鉴定和DNA序列分析均证实,MyoG基因已正确插入pEGFP-C1中,获得融合蛋白表达载体pEGFP-C1-MyoG,转染NIH-3T3细胞48h后,RT-PCR检测到约680bp的特异性条带,western blot检测出相对分子量约为53kD的融合蛋白,荧光显微镜分析表明,MyoG蛋白定位于细胞核。[结论]融合蛋白EGFP-MyoG在NIH-3T3细胞中成功表达,并定位于细胞核。

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收稿时间:2010-09-27
修稿时间:2010-11-04

Expression and Subcellular Localization of Hu Sheep Myogenin and EGFP Fusion Protein
Xu Feng,Qin Yurong,Yin Yanhui,Zhang Zhentao,Zhang Yani,Gao Bo,Du Lixin,Li Bichun. Expression and Subcellular Localization of Hu Sheep Myogenin and EGFP Fusion Protein[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2011, 27(7): 309-313
Authors:Xu Feng  Qin Yurong  Yin Yanhui  Zhang Zhentao  Zhang Yani  Gao Bo  Du Lixin  Li Bichun
Affiliation:Xu Feng 1,Qin Yurong 1,Yin Yanhui 1,Zhang Zhentao 1,Zhang Yani 1,Gao Bo 1,Du Lixin 2,Li Bichun 1 (1 College of Animal Science and Technology,Yangzhou University,Yangzhou Jiangsu 225009,2 National Center for Molecular and Breeding of Animal,Institute of Animal,CAA,Beijing 100193)
Abstract:To construct the eukaryotic expression vector for enhanced green fluorescent protein (EGFP) fused with Hu Sheep myogenin (MyoG) for investigating the subcellular localization of EGFP-MyoG fusion protein in the transfected NIH-3T3 cells.MyoG gene was amplified by PCRfrom pMD19-T-MyoG and inserted into the eukaryotic expression vector pEGFP-C1 to construct fusion protein expression vector pEGFP-C1-MyoG.Then NIH-3T3 cell was transfected with the constructed recombinant plasmid pEGFP-C1-MyoG.48 hours after tran...
Keywords:Hu Sheep  MyoG gene  EGFP protein  subcellular localization  
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