魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条的研制

【目的】研制魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条，为魏氏梭菌病的快速诊断提供新方法。【方法】采用分子生物学方法制备魏氏梭菌α毒素，将其免疫家兔制备多克隆抗体。用制备的抗魏氏梭菌α毒素多克隆抗体作为胶体金标记抗体和检测线上的捕获抗体，制备魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条，对其特异性、敏感性、稳定性和重复性进行检测。用制备的魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条对临床样品进行检测，比较其检测结果与PCR检测结果的符合率。【结果】成功制备了魏氏梭菌α毒素多克隆抗体。成功研制了α毒素快速诊断金标试纸条，其检测线上抗体的最适包被质量浓度为0.06 μg/mL。研制的试纸条仅与魏氏梭菌α毒素发生反应，且不同批次的试纸条重复检测结果无差异，表明试纸条具有较高的特异性和重复性；该试纸条最低可检测1.40 mg/mL的毒素量，与PCR方法测得结果符合率为80.77%，基本能满足实际应用要求。【结论】成功研制了魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条，该试纸条具有快速、特异、敏感、稳定等优点，适用于对魏氏梭菌病进行普查和检疫，具有良好的应用前景。