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肉食兽细小病毒核酸探针的制备及其初步应用研究
引用本文:赵永军,童光志,赵奕,白丽萍,殷震.肉食兽细小病毒核酸探针的制备及其初步应用研究[J].中国兽医学报,1990(1).
作者姓名:赵永军  童光志  赵奕  白丽萍  殷震
作者单位:兽医大学军事兽医研究所 (赵永军,赵奕),哈尔滨国家兽医生物技术实验室 (童光志,白丽萍),兽医大学军事兽医研究所(殷震)
摘    要:将提纯的貂肠炎病毒(MEV)中间复制型DNA(RF-DNA),以HinaⅡ酶切,回收0.7kbC片段并克隆至质粒pBR322中,构成重组质粒pBM,经转化大肠杆菌RRⅠ并扩增后,提纯pBM,酶切电泳回收克隆的C片段,以α-32P]dATP标记C片段和pBM,用光生物素标记pBM,分别制成放射性同位素和光生物素核酸探针。采用打点杂交技术检测了5种肉食兽细小病毒的细胞培养物和非细小病毒科5种病毒的细胞培养物,同时检测了貂和犬的粪便样品33份。结果表明,32P标记的C片段和pBM探针与光生物素际记的pBM探针均具有相同的杂交特异性,与5种肉食兽细小病毒及感染细小病毒的貂、犬粪样呈杂交阳性反应,与其他科病毒及健貂、犬粪样呈阴性。同位素32P和光生物素标记探针分别检出1 pg和10 pg貂肠炎病毒RF-DNA,敏感性比血凝试验分别离100倍和10倍。

关 键 词:肉食兽  细小病毒  32P  光生物素  核酸探针  打点杂交

Preparation and Preliminary Use of Nucleic Acid Probes for Carnivore Parvoviruses
Zhao Yongjun et al.Preparation and Preliminary Use of Nucleic Acid Probes for Carnivore Parvoviruses[J].Chinese Journal of Veterinary Science,1990(1).
Authors:Zhao Yongjun
Abstract:
Keywords:carnivore  parvovirus  32P  photobiotin  nucleic acid probe  dot hybridization
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