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人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响
引用本文:鲍珣,张拓,张涌.人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响[J].中国畜牧兽医,2009,36(8):42-46.
作者姓名:鲍珣  张拓  张涌
作者单位:(西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所, 杨凌 712100)
摘    要:利用包含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的真核表达载体pCI-neo-hTERT转染山羊胎儿成纤维细胞,筛选阳性克隆扩大培养,并对转染阳性细胞分别进行RT-PCR检测,倍性分析,细胞周期检测和细胞凋亡检测,以观察该基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响。试验结果表明,筛选出的阳性细胞现已传至第50代;RT-PCR检测,端粒酶基因成功整合到山羊胎儿成纤维细胞并持续表达;倍性分析结果显示,转基因第50代细胞呈正常二倍体;对细胞周期进行分析,结果显示转基因第50代细胞较未转染第30代细胞有较高的S期,说明该细胞DNA合成旺盛,具有很强的增殖能力;细胞凋亡检测结果发现,转基因第50代细胞中凋亡细胞的比例明显少于转染第30代山羊胎儿成纤维细胞。这些试验结果均表明,hTERT能增加山羊胎儿成纤维细胞体外培养的代数,并保持细胞良好的形态及较强的增殖能力。

关 键 词:hTERT  山羊  胎儿成纤维细胞  
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