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调节猪Smad3 表达的miRNA 鉴定
引用本文:李虹仪,张茂. 调节猪Smad3 表达的miRNA 鉴定[J]. 广东农业科学, 2014, 41(23): 123-126
作者姓名:李虹仪  张茂
作者单位:龙岩学院生命科学学院/预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室,福建龙岩,364012
摘    要:生物信息学预测猪Smad3为miR-23a的靶基因,为了研究猪Smad3与miR-23a之间的调节关系,人工合成miR-23a双链序列及Smad3基因3'UTR中mR-23a的结合位点序列,分别与带荧光的慢病毒质粒pshRNA-copGFP Lentivector及萤光素酶质粒pPGL3-control连接,构建重组质粒LV-shRNA-miR-23a和pPGL3-control-Smad3-3'UTR.将两重组质粒共转CHO细胞,以慢病毒空质粒与pPGL3-control-Smad3-3'UTR共转作为对照,48 h后收集细胞裂解液检测荧光素酶活性变化,提取细胞总RNA实时荧光定量检测荧光素酶基因mRNA表达变化.结果显示,试验成功构建了重组质粒LV-shRNA-miR-23a和pPGL3-control-Smad3-3'UTR.miR-23a能够显著抑制荧光素酶基因mRNA表达(P<0.05),并能通过抑制Smad3结合位点序列抑制其上游荧光素酶的活性(P<0.05).初步证明,猪Smad3与miR-23a有直接的靶向关系.

关 键 词:Smad3  miR-23a  荧光素酶

Identification of miRNA regulated Porcine Smad3 expression
LI Hong-yi,ZHANG Mao. Identification of miRNA regulated Porcine Smad3 expression[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2014, 41(23): 123-126
Authors:LI Hong-yi  ZHANG Mao
Abstract:
Keywords:Smad3   miR-23a   luciferase
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