丝裂霉素C对制备干细胞饲养层效果的影响 |
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引用本文: | 彭三凤,王利,周学亮,陈美娟,陈东阳,杨小淦,许慧艳,卢晟盛,张明. 丝裂霉素C对制备干细胞饲养层效果的影响[J]. 广西农业科学, 2015, 46(5) |
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作者姓名: | 彭三凤 王利 周学亮 陈美娟 陈东阳 杨小淦 许慧艳 卢晟盛 张明 |
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作者单位: | 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室/广西高校动物繁殖与动物生物技术重点实验室,南宁,530005 |
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基金项目: | 广西科学研究与技术开发计划项目,广西高等学校高水平创新团队及卓越学者计划项目 |
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摘 要: | [目的]筛选出丝裂霉素C制备干细胞饲养层的最佳处理浓度,为建立完善干细胞饲养层培养体系奠定基础.[方法]以STO(SIM小鼠成纤维细胞耐硫代鸟嘌呤和耐鸟苯苷亚系)、MEF(原代分离的小鼠胎儿成纤维细胞)和BRL(大鼠肝细胞)为研究对象,分别以0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 μg/mL丝裂霉素C处理汇合度为90%~ 100%的STO、MEF、BRL细胞单层2h,继续培养3d后统计各处理组饲养层细胞的存活数量及增殖细胞比例,并用EdU免疫荧光标记法检测细胞的增殖状况.[结果]随着丝裂霉素C处理浓度的增加,饲养层增殖细胞数量占总细胞数量的比例均呈逐渐降低趋势.丝裂霉素C处理STO、BRL、MEF的最佳浓度分别为5.0、10.0和10.0 μg/mL,对应的增殖细胞比例分别为6.8%、3.0%和2.1%.[结论]丝裂霉素C能有效抑制干细胞饲养层细胞的增殖并保持良好活性,但不同饲养层细胞的最佳处理浓度有所差异.
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关 键 词: | 饲养层 丝裂霉素C EdU免疫荧光检测 细胞增殖 |
Effect of mytomycin-C on preparetion of stem cell feeder layer |
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Abstract: | |
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Keywords: | feeder layer cell mytomycin-C EdU immunofluorescent assay cell proliferation |
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