大菱鲆表皮蛋白质组双向电泳技术的建立及优化 |
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作者姓名: | 薛宝贵 黄智慧 周洲 马爱军 |
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作者单位: | 1. 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,266071;上海海洋大学水产与生命学院,201306 2. 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,266071 |
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基金项目: | 现代农业产业技术体系建设专项资金,国家支撑计划专题,农业公益性行业科研专项经费项目,和国家863计划课题 |
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摘 要: | 通过对表皮蛋白质提取方法、不同裂解液配方、等点聚焦程序和上样量等条件的对比试 验,建立及优化了大菱鲆表皮组织蛋白质的双向电泳体系.试验采用改良的TCA/丙酮和超声波提取相结合的方法提取大菱鲆表皮组织的全蛋白,裂解液配方根据Bio-Rad公司推荐的进行调整,使用17 cm pH 4~7的IPG胶条被动水化上样,上样量为250μg.等点聚焦程序采用30 V线性6 h、250V线性2.5 h、500 V线性1.5 h、1 000 V快速2 h、4 000 V线性3 h、8 000 V快速3 h、8 000 V线性1 h、500V 24 h,凝胶银染后用Image Master 2D Platinum 7.0软件进行分析,最终得到较满意的双向电泳图谱,具有较高的分辨率和重复性,为大菱鲆蛋白质组学的进一步研究奠定了基础.
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关 键 词: | 大菱鲆 表皮组织 蛋白质 双向电泳 |
收稿时间: | 2010/8/24 0:00:00 |
修稿时间: | 2010/11/2 0:00:00 |
Establishment and optimization of two-dimensional gel electrophoresis for epidermal proteome of turbot Scophthalmus maximus |
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Authors: | XUE Bao-gui HUANG Zhi-hui ZHOU Zhou MA Ai-jun |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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