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石榴ISSR-PCR反应体系的正交设计优化
引用本文:赵丽华. 石榴ISSR-PCR反应体系的正交设计优化[J]. 北方园艺, 2010, 0(19)
作者姓名:赵丽华
作者单位:西昌学院农业科学学院;西南大学园艺园林学院;重庆市花卉工程技术研究中心;
基金项目:四川省教育厅科研基金,西昌学院科研课题资助项目
摘    要:现利用正交设计L16(45)探讨DNA模板、Mg2+、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶对石榴ISSR-PCR反应体系的影响,首次应用加权平均法及百分制对正交实验结果进行评分,并应用DPS数据处理系统进行数据分析;同时对石榴ISSR-PCR最佳反应体系进行退火温度梯度试验。结果表明:适合石榴的ISSR-PCR最优反应体系(25μL)为:Mg2+1.75 mmol/L、dNTPs0.15 mmol/L、TaqDNA聚合酶1 U、引物0.8 mmol/L、DNA模板20 ng;引物UBC 811的最适退火温度为51.2℃,且最适退火温度因引物而异。

关 键 词:石榴  正交设计  ISSR  反应体系  优化

Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Pomegranate in Orthogonal Design
ZHAO Li-hua. Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Pomegranate in Orthogonal Design[J]. Northern Horticulture, 2010, 0(19)
Authors:ZHAO Li-hua
Affiliation:ZHAO Li-hua1,2(1.Agricultural Sciences Institute,Xichang College,Xichang,Sichuan 615013,2.College of Horticulture and Landscape Architecture,Southwest University,Flower Engineering Technology Research Center,Chongqing 400715)
Abstract:The optimize ISSR-PCR reaction system of pomegranate was studied,the orthogonal design L16(45)was used to optimize 5 factors Taq DNA polymerase,Mg2+,DNA template,dNTPs and primerof ISSR-PCR amplification system for pomegranate,the weighted average method and hundred mark system are used to evaluate the results of the orthogonal scoring,the DPS data processing systems was used data analysis;And then do annealing temperature gradient test to optimize ISSR-PCR reaction system.The results showed that the best I...
Keywords:pomegranate  orthogonal design  ISSR  reaction system  optimization  
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