| 摘 要： | 甲基磺酸乙酯(Ethylmethylsulfone, EMS)作为简易、有效的诱变剂在高粱诱变育种中得到广泛应用。由于诱变后代开放授粉,易接受其它高粱材料花粉出现假突变体的可能,因此开发一套实用的分子标记鉴定突变体真伪是非常有必要的。研究基于26份高粱材料的重测序数据,共开发13 390个≥3 bp重复的SSR分子标记。在基因上和非基因上各选择100个标记进行有效性和丰度检测,最终选择PCR扩增目标条带较单一、多态性丰富的30个标记用于EMS突变体真伪鉴定。选择5个与BTx623杂交获得的RIL群体株系、5个已知BTx623 EMS诱变突变体以及5个新筛选的BTx623 EMS诱变突变体为对象,检测30个SSR分子标记的有效性及鉴别能力。与亲本BTx623相比,5个RIL株系中PCR扩增条带存在差异的标记分别为10、11、12、10和9个。而5个已知突变体以及新筛选突变体3T133、4A317和2E52 PCR扩增条带与亲本BTx623一致。新筛选突变体4A478和4A211分别有6个和5个标记PCR扩增条带大小与亲本BTx623存在差异,结合田间表型,判定两者皆为假突变体。由此可见,本研究筛选鉴定的≥3 bp重复的30个SSR分子标记可以用于EMS突变体真伪鉴定。
|
