| 施马伦贝格病毒RT-LAMP检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 袁向芬,吴绍强,张永宁,林祥梅. 施马伦贝格病毒RT-LAMP检测方法的建立[J]. 中国动物检疫, 2015, 32(3): 73-77 |
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| 作者姓名： | 袁向芬 吴绍强 张永宁 林祥梅 |
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| 作者单位： | 中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所 |
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| 基金项目： | 质检公益性行业专项（201210018）；国家科技支撑计划课题（2013BAD12B00） |
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| 摘 要： | 通过对施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)及其同属各病毒基因序列进行比对分析,设计了针对SBV S基因节段的一组6条特异性引物,经优化建立了SBV RT-LAMP检测方法,可在63℃恒温条件下,于50min内完成目的序列扩增,通过染料法和琼脂糖凝胶电泳法观察结果,其灵敏度可达10TCID50,与荧光RT-PCR方法具有相同的敏感性。特异性试验显示,本方法与同属的沙门达病毒(Shamonda virus)会发生交叉反应,需借助沙门达病毒S基因节段上的一个特异性酶切位点Afl II进行酶切,实现两者的鉴别诊断。对103份临床样品的检测结果显示,本方法与荧光RT-PCR方法符合率为100%。本研究建立的RT-LAMP方法快速、简单、灵敏度高,不仅适用于实验室鉴定,还可应用于口岸、野外等的临床大规模监测。
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| 关 键 词： | 施马伦贝格病毒 检测方法 RT-LAMP 荧光定量RT-PCR 样品检测 |
Development and Preliminary Application of a Novel RT-LAMP Assayfor Schmallenberg Virus |
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| Yuan Xiangfen,Wu Shaoqiang,Zhang Yongning,Lin Xiangmei. Development and Preliminary Application of a Novel RT-LAMP Assayfor Schmallenberg Virus[J]. China Animal Health Inspection, 2015, 32(3): 73-77 |
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| Authors: | Yuan Xiangfen Wu Shaoqiang Zhang Yongning Lin Xiangmei |
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| Affiliation: | Yuan Xiangfen;Wu Shaoqiang;Zhang Yongning;Lin Xiangmei;Chinese Academy of Inspection and Quarantine; |
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