| 利用Cre/loxp定位重组系统构建雄性不育基因和恢复基因表达载体 |
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| 引用本文： | 宋洪元,曹必好,丁建刚,雷建军,宋明. 利用Cre/loxp定位重组系统构建雄性不育基因和恢复基因表达载体[J]. 农业生物技术学报, 2004, 12(4): 396-400 |
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| 作者姓名： | 宋洪元 曹必好 丁建刚 雷建军 宋明 |
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| 作者单位： | 1. 西南农业大学园艺园林学院,重庆,400716
2. 华南农业大学园艺系,广州,510642 |
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| 基金项目： | .国家自然科学基金(No.30200185)和重庆市应用基础研究项目(No.200217)资助. |
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| 摘 要： | 结合Cre/lox定位重组系统和杂种一代的育种特点，构建了反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pCABARTAAct和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre。将位于质粒pSTAAct中的反义肌动蛋白雄性不育基因表达盒(含TA29启动子、反向插入TA29启动子下游的Actin基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp两个同向lox位点之间，再将上述表达盒连同lox位点切下插入pcAMBar，获得以除草剂Basta为筛选剂的反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pcABARTAAct。PCR方法从溶原菌BM25．8基因组DNA扩增出Cre基因，克隆测序验证无误后插入PBl525 CaMV35S-35S双启动子和Nos终止子之间，再将表达盒切下插入pBINPLUS质粒相应位点，得到恢复基因植物表达载体pBINPLUSCre。
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| 关 键 词： | 基因表达载体 雄性不育基因 系统构建 定位 除草剂Basta Nos终止子 Cre／lox 肌动蛋白 植物表达载体 基因表达盒 Cre基因 DNA扩增 PCR方法 启动子 杂种一代 重组系统 克隆载体 克隆测序 恢复基因 插入 反义 位点 n基因 筛选剂 |
| 修稿时间： | 2003-07-31 |
Constructions of Male Sterility Gene and Fertility Restoring Gene Expression Vectors by Cre/loxp Site-specific Recombination System |
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