表面活性剂LAS在棉花高通量DNA提取中的应用

本研究以棉花种子和叶片为材料，探索一种适用于棉花DNA高通量提取的方法。通过在裂解液中加入APG、LAS、CPB、DTAB、Tween80、SDS和CTAB 7种不同表面活性剂，比较其在棉花种子和叶片中的DNA提取效果，并与磁珠法和氯仿抽提法两种高通量纯化方法结合，对比传统SDS和CTAB提取液提取效果。结果表明，加入LAS表面活性剂的裂解液提取的DNA效果较好，提取棉花种子和叶片的浓度可达2 127.61和572.70 ng/μL,OD260/280分别为1.97和1.98，上清液清澈透明。LAS与两种纯化方式结合的DNA提取效果都明显优于传统CTAB和SDS提取液的提取效果，其中LAS与氯仿抽提的纯化方法结合提取效果最好，且DNA提取通量可达到600个样品/2 h。LAS表面活性剂能在棉花种子和叶片DNA提取中都能起到促进作用，与氯仿抽抽提纯化方法相结合可兼顾DNA提取通量与质量，能满足后续大部分分子实验要求。