烟草疫霉PnRXLR5863的克隆及信号肽鉴定

烟草疫霉引起的剑麻斑马纹病是剑麻生产的主要病害之一。RXLR效应蛋白是疫霉菌中数量最多的一类效应蛋白。为了分离鉴定烟草疫霉中对剑麻产生致病作用的RXLR效应蛋白，本研究基于生物信息分析结合PCR技术克隆候选基因，并利用酵母信号肽捕获系统对信号肽进行功能研究。本研究从烟草疫霉中克隆了一个编码RXLR效应蛋白的基因，命名为PnRXLR5863；该基因长度为402个碱基，编码的蛋白含有134个氨基酸；分子量为15.46 kD，等电点为5.27，是一个疏水性蛋白；SignalP 4.0预测该蛋白含有一个长度为23个氨基酸的信号肽；进化分析结果显示，PnRXLR5863与来自烟草疫霉的蛋白亲缘关系最近；实验结果表明，PnRXLR5863的信号肽，能够使YTK12酵母菌株在CMD-W和YPRAA培养基上生长，并且能将TTC溶液转变为砖红色，表明PnRXLR5863的信号肽具有分泌活性。本研究的结果为进一步研究烟草疫霉侵染剑麻过程中Pn RXLR5863的致病功能提供依据。