梭梭HaFT-1、HaFT-9基因启动子克隆及胁迫响应分析

14-3-3蛋白是一类普遍存在于真核生物中的分子伴侣，研究表明梭梭14-3-3蛋白HaFT-1和HaFT-9功能与胁迫响应密切相关。为进一步分析HaFT-1和HaFT-9基因胁迫响应机制，本研究采用染色体步移技术扩增HaFT-1和HaFT-9基因5’端上游调控序列，分别获得961和879 bp启动子序列。序列分析表明二者启动子除含有基本的启动子核心元件外，还包含多种逆境响应元件。分别构建HaFT-1和HaFT-9基因启动子-GUS重组载体瞬时转化烟草、棉花、梭梭幼苗，GUS染色结果显示：二者启动子在正常生长条件或高温、脱水、NaCl胁迫及ABA处理下均能调控GUS表达，并且HaFT-1启动子对以上处理的响应更加明显；在高温胁迫下，梭梭幼苗中二者启动子调控的GUS表达具有组织特异性。RT-qPCR结果显示，在梭梭幼苗中，高温、脱水、NaCl胁迫及ABA处理下HaFT-1和HaFT-9基因表达趋势与以上GUS染色结果基本一致。本研究为进一步阐明HaFT-1和HaFT-9基因在胁迫响应中的作用机制提供了科学依据。