剑麻AhKH1775基因克隆及其酵母双杂交诱饵载体构建

KH结构域蛋白参与调控植物开花时间、花器官形成、叶发育、miRNA产生和对生物非生物胁迫的响应。前期实验发现AhKH1775可能参与调控剑麻株芽的发育，但是其调控机制仍不清楚。KH结构域蛋白可以通过复合体的方式参与转录后基因表达调控。为获得与AhKH1775相互作用的蛋白，本研究克隆了AhKH1775的完整编码框，构建了酵母双杂交诱饵载体，并检测了诱饵载体的毒性和自激活性。结果显示，克隆获得一个918 bp的编码框，成功构建了诱饵载体，诱饵载体无毒性，但存在自激活性，25 mmol/L的3-AT可以抑制诱饵载体的自激活性。本研究结果为进一步筛选与AhKH1775相互作用的蛋白和深入研究AhKH1775在剑麻中的功能提供依据。