杏高通量荧光SSR检测体系及分子身份证的构建

本研究以杏(Prunus armeniaca L.)为试材，根据M13荧光引物和巢式PCR理论，通过调整巢式PCR内两部分循环数、M13荧光引物与正向引物比例和4种荧光(FAM, VIC, NED和PET)产物混合比例3个主要因素，建立了高通量荧光标记SSR检测体系。结果显示，当循环数比设为15∶25、M13荧光引物与正向引物比例为4∶1时，巢式PCR反应体系达到最佳。4种荧光产物按照1μL∶1μL∶1μL∶2μL混合稀释30倍上机检测，所得荧光信号较强、峰高均匀、稳定性好。在建立的体系基础上，筛选了12对多态性良好的李属(Prunus)SSR引物，构建了50份中国杏种质资源的分子身份证。各材料的遗传分子身份证具有唯一性、易读性，可以将种质资源精确的区分开，有利于中国杏种质资源鉴定和保护、品种权益保护和品种创新的激励。