利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建水稻OsABI5突变体

在水稻种植生产上，因其种子经常发芽率不齐，导致水稻直播困难，不仅影响水稻的生产成本还影响其产量，因此水稻直播的突出问题要保持优良的种子萌发力。ABA是种子萌发的抑制因子，它通过诱导ABI5的表达来抑制种子萌发，在种子正常萌发的过程中，随着种子吸胀和GA生物合成，ABA和ABI5的含量都迅速下降，促使种子萌发。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建OsABI5突变体，以期提高种子的萌发率和萌发速度。通过农杆菌介导法将构建好的OsABI5敲除质粒转化‘日本晴’水稻的愈伤组织，经PCR和Western Blot鉴定筛选得到两株OsABI5弱表达的阳性突变株系。通过对osabi5-2突变体和‘日本晴’萌发表型的观察，发现osabi5-2突变体2 d发芽率显著高于‘日本晴’，二者4 d的萌发势也是osabi5-2突变体略高。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了OsABI5突变体，对研究水稻OsABI5调控种子萌发的分子机制具有重要意义。