长春花茉莉酸受体CrCOI1的生物信息学分析与原核表达

通过生物信息学方法对长春花茉莉酸受体CrCOI1氨基酸序列、结构域以及二级、三级结构进行分析，利用分子生物学方法构建重组质粒并进行原核表达。结果显示：CrCOI1编码516个氨基酸，为胞质定位，分子量为58.26 k D，等电点pI为5.45，与番薯COI1蛋白的亲缘关系比较近，CrCOI1含有F-box结构域、多个LRR富集亮氨酸重复结构域以及转运抑制响应1结构域；该蛋白二级结构由50.97%α-螺旋、31.59%无规则卷曲、12.79%延伸链以及少部分β-转角(4.65%)组成；经SWISS-MODEL预测其三级结构显示，CrCOI1蛋白由α-螺旋和无规则卷曲组成，其中F-box的3个α-螺旋从蛋白的N端伸出便于结合配体。进一步地成功构建了重组表达质粒pET28a-CrCOI1，并经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中实现异源表达，且发现经16℃、0.4 mmol/L IPTG诱导至12 h后蛋白表达量最高，具有时间依赖性。上述结果表明，我们成功构建了长春花茉莉酸受体CrCOI1的重组表达质粒，实现大肠杆菌中的表达，并对其进行了序列以及结构分析。这为研究CrCOI1的功能以及通过其介...