抗病基因PR1在大豆中的遗传转化与多抗材料的培育

单一抗病、抗虫品种在农业生产中已经不能满足需要，本研究通过基因工程技术构建抗病基因pCAMBIA-3301-PR1表达载体，通过花粉管通道法转化外源抗病基因PR1到含有CryAB-13-1转基因高世代受体大豆中，得到兼具抗病抗虫新材料。对T2转基因植株进行常规PCR检测，Southern Blot杂交，Real Time PCR检测，室内、室外抗虫鉴定，室内抗病鉴定。结果表明，在T2代常规PCR检测中，阳性植株共15株。Southern Blot杂交结果显示，PR1与CryAB-13-1基因均以单拷贝子的形式整合在大豆中。Real Time PCR表明PR1和CryAB-13-1基因在不同组织中表达量有差异，PR1基因在植物根、茎、叶中表达量平均分别为2.88、1.48、5.86,CryAB-13-1基因在根、茎、叶中表达量平均分别为3.03、1.32、7.11。室外抗虫鉴定阳性植株CryAB-13-1基因的植株虫食率为3.47%，抗虫级别上属于R-抗，抗虫级别从感虫到抗虫级别。室内采用圆盘分隔法进行抗虫鉴定，转化植株芽长有明显增长。室内抗病鉴定未转化植株平均死亡率高达58.34%，转...