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抗Spodoptera f.病毒单克隆抗体的初步研制
引用本文:陆苹,Michael Ma.抗Spodoptera f.病毒单克隆抗体的初步研制[J].上海交通大学学报(农业科学版),1987(1).
作者姓名:陆苹  Michael Ma
作者单位:上海农学院 中国(陆苹),马里兰大学 美国(Michael Ma)
摘    要:本文介绍了 Spodoptera frugiperda 病毒多角体及病毒粒子的提纯方法。粗提材料先通过40%蔗糖,在10000r/min 下离心15分钟,随后悬浮于0.01M Tris 缓冲液,25~65%蔗糖的连续梯度中,于40000 r/min 下离心30分钟。取出多角体的条带,洗除游离残存的蔗糖,透析过夜。将多角体在4℃,0.01MNa_2CO_3,0.01MEDTA,0.17M NaCl,pH=1下,作用1小时,随后调节 pH 到8.5~8.9,2000g,离心10分钟。该制剂在4℃下,25~60%蔗糖梯度中,24000r/min,离心2小时。随后取出病毒粒子,重新悬浮于蒸馏水中,于—70℃下贮藏备用。每个 BALB/C 小白鼠免疫4~5次,最后一次注射是在融合前4~7天。将2×10~8脾细胞与2×10~7P_3×63或 SP-2骨髓瘤细胞混合,并用50%PEG(Sigma)融合,用间接酶联免疫法进行筛选阳性杂交瘤细胞,强阳性者进行克隆化。以多角体及病毒粒子为抗原者,均建立了10株能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该抗体的效价较高,并进行了血清学的分类。

关 键 词:Spodoptera  f.病毒  多角体  单克隆抗体

DEVELOPMENT OF MONOCLONAL ANTIBODIES TO SPODOPTERA FRUGIPERDA VIRUS
Lu Ping.DEVELOPMENT OF MONOCLONAL ANTIBODIES TO SPODOPTERA FRUGIPERDA VIRUS[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),1987(1).
Authors:Lu Ping
Institution:Lu Ping (Shanghai Agricultural College) P.R.C Michael Ma (University of Maryland) U.S.A
Abstract:
Keywords:Spodoptera frugiperda virus  Polyhedra  Monoclone Antibody
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