牛病毒性腹泻病毒E2基因在昆虫细胞中的表达 |
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引用本文: | 范晴,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢志勤,谢丽基,罗思思. 牛病毒性腹泻病毒E2基因在昆虫细胞中的表达[J]. 动物医学进展, 2013, 34(4) |
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作者姓名: | 范晴 谢芝勋 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 罗思思 |
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作者单位: | 广西兽医研究所广西动物疫苗和新技术重点实验室,广西南宁,530001 |
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基金项目: | 国家百千万人才工程人选专项,广西特聘专家专项,广西科技攻关项目,广西自然科学基金项目 |
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摘 要: | 为了获得具有良好抗原性的牛病毒性腹泻病毒E2囊膜蛋白,利用PCR方法扩增牛病毒性腹泻病毒E2基因,连接于昆虫杆状病毒表达载体中,构建pFastBacHTA-E2重组质粒.将该重组质粒转化入DH10BAC感受态细胞,经PCR鉴定获得转座杆粒Bacmid-E2.转座杆粒Bacmid-E2转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,感染细胞后,收获得到目的蛋白,用SDS-PAGE和Western blot对重组的表达蛋白进行分析.结果表明,重组E2蛋白大小为43.6 ku,与预期值相符,该蛋白能与牛病毒性腹泻病毒阳性血清发生特异性反应,为进一步研发牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒奠定基础.
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关 键 词: | 牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 杆状病毒表达体系 昆虫细胞 |
Expression of E2 Gene of Bovine Virus Diarrhea in Insect Cells |
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