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猪α、γ干扰素的原核表达、纯化及抗病毒活性初步研究
引用本文:赵伟鸽,单同领,朱建国,林源,华修国.猪α、γ干扰素的原核表达、纯化及抗病毒活性初步研究[J].上海交通大学学报(农业科学版),2010,28(1).
作者姓名:赵伟鸽  单同领  朱建国  林源  华修国
作者单位:1. 上海交通大学,农业与生物学院,上海市兽医生物重点实验室,上海,200240
2. 西北农林科技大学,陕西,712100
摘    要:提取猪白细胞DNA、猪脾脏RNA,特异性引物扩增猪IFN-α、IFN-γ基因,将IFN-α和IFN-γ基因分别插入原核表达载体pET-30构建重组表达质粒pET-30-IFN-α和pET-30-IFN-γ,转化大肠杆菌B121,在IPTG诱导下表达猪IFN-α及IFN-γ,SDS-PAGE分析重组表达蛋白;用细胞病变抑制法检测重组表达蛋白的抗病毒活性.结果表明成功构建重组表达质粒pET-30-IFN-α和pET-30-IFN-γ;SDS-PAGE可检测到相对分子质量为21.3 Ku和19.4 Ku的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在;经Ni2+-NTA亲和层析纯化,获得高纯度重组蛋白;纯化的猪IFN-α和IFN-γ抗星状病毒复制的活性分别为3.15×103 U·mg-1和2.48×103 U·mg-1.

关 键 词:猪α、γ干扰素  原核表达  纯化  抗病毒活性

Prokarotic Expression,Purification and Antiviral Activity Detection of Porcine Interferon-α and Interferon-γ
ZHAO Wei-ge,SHAN Tong-ling,ZHU Jian-guo,LIN Yuan,HUA Xiu-guo.Prokarotic Expression,Purification and Antiviral Activity Detection of Porcine Interferon-α and Interferon-γ[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2010,28(1).
Authors:ZHAO Wei-ge  SHAN Tong-ling  ZHU Jian-guo  LIN Yuan  HUA Xiu-guo
Institution:ZHAO Wei-ge1,SHAN Tong-ling1,ZHU Jian-guo1,LIN Yuan2,HUA Xiu-guo1(1.School of Agriculture , Biology,Shanghai Key Lab of Veterinary Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China,2.Northwest A&F University,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:
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